Konferencja V Dni Młodych Liderów Jakości

W ramach działań promujących rezultaty operacji na konferencji V Dni Młodych Liderów Jakości link tutaj organizowanej przez Uniwersytet Ekonomiczny w Poznaniu inż. Eryk Gołaszewski, który uczestniczył w realizacji operacji, przygotował i poprowadził prezentację oraz warsztaty pt: "Grzyby, mniej obce".


W ramach działań promujących operację prof. Marta Ligaj

prowadziła stoisko edukacyjne w Nobel Tower w Poznaniu przy ul. Dąbrowskiego 77a na wydarzeniu "Kobiecość" organizowanym przez Drużynę Szpiku.

Uprawa soplówki jeżowatej prowadzona w boksach uprawowych w kontrolowanych warunkach dawała obfite plony.


Podsumowanie wyników realizacji projektu

„Opracowanie innowacyjnych produktów na bazie suszu z ekologicznie uprawianej soplówki jeżowatej (Hericium erinaceus) o wysokich parametrach jakościowych i funkcjonalnych”, umowa o dofinansowanie nr 00048.DDD.6509.00252.2022.15

I. Realizacja operacji przyczyniła się do wprowadzenia 4 innowacji produktowych o unikalnych cechach jakościowych i funkcjonalnych:

1. Gama 4 odmian soplówki jeżowatej (1 odmiana komercyjna i 3 nowe odmiany z kolekcji grzybów uprawnych i leczniczych Katedry Warzywnictwa Uniwersytetu Przyrodniczego w Poznaniu). Innowacja ta zapewni przewagę na rynku w postaci możliwości dopasowania uprawianej odmiany do potrzeb konsumentów. W ramach wykonanych prac wytypowano odmianę o najwyższej przydatności kulinarnej, cechującą się atrakcyjnością sensoryczną. Poza tym wytypowano odmiany lepiej owocujące w temp. niższych oraz w temp. wyższych. Można w związku z tym, w zależności od pory roku, prowadzić uprawę odmiany preferującej daną temperaturę, co ograniczy koszty zużycia energii elektrycznej związanej z zapewnieniem odpowiedniej temperatury dla wegetacji grzyba. Spośród uprawianych odmian wytypowano dwie odmiany, w których zawartość glukanów w suchej masie owocników została wystandaryzowana dla upraw prowadzonych w warunkach kontrolowanych na poziomie 20% β-glukanów i powyżej 2% α-glukanów. Aktywność antyoksydacyjna (oznaczana metodami chemicznymi i elektrochemicznymi) wykazała zakładany w projekcie stopień wzrostu wynoszący co najmniej 15% w stosunku do uprawy konwencjonalnej. Dodatek łuski kawy oraz łuski sojowej okazał się być najbardziej istotnym czynnikiem wpływającym na aktywność przeciwutleniającą owocników.


Podsumowanie wyników badań – etap 1

1. Opracowanie innowacyjnego sposobu ekologicznej uprawy soplówki jeżowatej o wysokich parametrach jakościowych i funkcjonalnych.

Na podłożach agarowych oraz płynnych testowano wpływ różnych składników na wzrost hodowli grzyba. Badano takie składniki jak: trociny drzew liściastych, ziarniaki zbóż, proso, otręby, wytłoki z owoców, warzyw, roślin oleistych, składniki mineralne. Rezultatem prac badawczych było zaprojektowanie składu 3 podłoży uprawowych (substratów) o zróżnicowanym składzie na bazie trocin bukowych, otrębów pszennych, łusek sojowych, łusek z kawy, wytłoków z roślin oleistych, mielonej kukurydzy, gipsu o składzie:

  • Substrat 1: 1000 g trociny bukowe, 100 g łuska kawy, 100 g wytłoki z lnu, 50 g otręby pszenne, 5 g gips
  • Substrat 2: 1000 g trociny bukowe, 250 g otręby pszenne, 50 g kukurydza mielona, 5 g gips
  • Substrat 3: 1000 g trociny bukowe, 300 g łuska sojowa, 5 g gips

Badania wzrostu różnych odmian soplówki jeżowatej na podłożach płynnych i agarowych pozwoliły na wytypowanie do uprawy w etapie pierwszym 4 odmian oznaczonych jako HE01, HE08, HE13 i HE14. Uprawę prowadzono w warunkach niekontrolowanych oraz kontrolowanych, obejmujących monitorowanie temperatury i wilgotności oraz z zastosowaniem pilotażowego systemu dezynfekcji pomieszczeń uprawowych. Uprawy prowadzono wg planu:

  • 1 plon - warunki konwencjonalne, niekontrolowane
  • 2 plon - warunki kontrolowane (16°C, wilgotność 90%), dezynfekcja
  • 3 plon - warunki kontrolowane (16°C, wilgotność 95%), dezynfekcja
  • 4 plon - warunki kontrolowane (18°C, wilgotność 90%), dezynfekcja
  • 5 plon - warunki kontrolowane (18°C, wilgotność 95%), dezynfekcja
  • 6 plon - warunki kontrolowane (20°C, wilgotność 90%), dezynfekcja
  • 7 plon - warunki kontrolowane (20°C, wilgotność 95%), dezynfekcja

W poniższych tabelach zamieszczono wyniki wykonanych badań, obejmujące badania plonowania (wykonane u Rolnika) oraz analiz cech funkcjonalnych i jakościowych zebranych owocników (wykonane w spółce Mykoherbals i na UEP).


W kwietniu br. w ramach działań promujących operację prof. Marta Ligaj wygłosiła wykład pt. "Soplówka jeżowata – grzyb inny niż myślisz" na Poznańskim Festiwalu Nauki i Sztuki.

Badania prowadzone w ramach realizacji projektu zostały wyróżnione przez Polskie Centrum Rozwoju i Innowacji Nauki. Prof. Marta Ligaj została laureatką programu wizerunkowego „Polski Innowator 2024”.

14 kwietnia 2024 r. odbyło się kolejne zebranie Rady Konsorcjum, w którym uczestniczyli Pani Ewa Myślińska – prezes spółki Mykoherbals, Pani Marta Ligaj – kierownik projektu ze strony UEP oraz Pan Mariusz Mulka wraz z żoną Beatą. Na zebraniu omówiono wyniki badań suszu z soplówki jeżowatej wykonane w etapie 2. projektu.

W etapie 2 realizacji operacji soplówka jeżowata owocowała w zoptymalizowanych warunkach dając plony owocników o wysokich parametrach użytkowych i funkcjonalnych, co potwierdzono wykonując badania pomiaru masy oraz suchej masy zebranych owocników i zawartości związków o potencjale antyoksydacyjnym oraz alfa- i betaglukanów. W ustalonych jako optymalne warunkach uprawy średnia masa owocnika wynosiła w pierwszym rzucie ok. 700 g, przy czym łączna waga zebrana z jednego substratu wynosiła średnio 1000 g. Oznaczona zawartość suchej masy osiągała co najmniej 15%. Na zdjęciu poniżej prezentowany jest przykładowy owocnik zebrany w drugim rzucie.

Przygotowany w prototypowych suszarniach susz z owocników charakteryzował się wysokim stopniem czystości mikrobiologicznej. Dzięki wykorzystaniu zjawiska zimnej plazmy w 25 g zmielonego suszu nie wykryto drobnoustrojów E. coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes i Salmonella spp. Zastosowanie 2 oraz 3 generatorów zimnej plazmy w prototypowych suszarniach pozwoliło uzyskać susz, którego posiewy wykazały obecność jedynie nielicznych kolonii pleśni. Zastosowanie do otrzymania suszu procesu liofilizacji zamiast procesu suszenia skutkowało wyższym stopniem zanieczyszczenia mikrobiologicznego otrzymanego suszu. W związku z tym, że liofilizacja jest procesem bardziej energochłonnym niż suszenie niskotemperaturowe, ostatecznie do produkcji suszu zdecydowano się stosować proces suszenia.

Dla niemielonych i zmielonych prób suszu, bezpośrednio oraz po ich przechowywaniu w opakowaniach szklanych lub w opakowaniach próżniowych, w temperaturze pokojowej lub w warunkach chłodniczych przez okres od jednego do czterech miesięcy, wykonano oznaczenia zawartości związków o potencjale antyoksydacyjnym, glukanów oraz ogólnej liczby drobnoustrojów tlenowych. Optymalnym sposobem przechowywania suszu, tak aby doszło do jak najmniejszych strat jego funkcjonalności, jest przechowywanie próżniowe w postaci niemielonej, niezależnie czy ma to miejsce w temperaturze pokojowej czy w warunkach chłodniczych. Po 4 miesiącach takiego przechowywania zanotowano spadek aktywności antyoksydacyjnej suszu na najniższym poziomie, wynoszący od 2 do 6% w zależności od zastosowanej metodyki badawczej. Poziom glukanów pozostał niezmieniony. W warunkach tych nie dochodziło również do wzrostu zawartości wody w suszu, co jest niezbędne dla zahamowania rozwoju drobnoustrojów. Procentowa zawartość wody w suszu po jego wysuszeniu wynosiła od 6 do 9% i utrzymywała się na tym poziomie po 4 miesiącach przechowywania.


3 lutego oraz 9 marca 2024 r. odbyły się kolejne zebrania Rady Konsorcjum

3 lutego oraz 9 marca 2024 r. odbyły się kolejne zebrania Rady Konsorcjum, w których uczestniczyli Pani Ewa Myślińska – prezes spółki Mykoherbals, Pani Marta Ligaj – kierownik projektu ze strony UEP oraz Pan Mariusz Mulka wraz z żoną Beatą. Na zebraniach omówiono wyniki badań pierwszej fazy etapu 2. projektu. Zebrania odbyły się w badawczo-przemysłowej siedzibie spółki Mykoherbals utworzonej w ramach realizacji etapu 1.

Zoptymalizowane w pierwszym etapie warunki uprawy soplówki jeżowatej oraz odpowiedni dobór substratów do podłoży uprawowych i wytypowanie odmian charakteryzujących się wysokimi parametrami użytkowymi pozwoliło na uzyskanie powtarzalnych plonów owocników, co jest niezbędne do standaryzacji uzyskanego z nich suszu. Wysoka jakość mikrobiologiczna owocników została osiągnięta dzięki zastosowaniu procesu dezynfekcji powietrza i powierzchni uprawowych poprzez wykorzystanie oczyszczaczy fotokatalitycznych i generatorów zimnej plazmy oraz dodatkowe zastosowanie ditlenku chloru w nawilżaczach.

Umożliwiło to uzyskanie wysokiego stopnia czystości mikrobiologicznej środowiska uprawy, co stale monitorowano metodą zderzeniową oraz odciskową. Jest to niezwykle istotny element procesu uprawy gwarantujący wysokie plonowanie grzyba. Pleśnie i bakterie bytujące w pomieszczeniach uprawowych wpływały zarówno na obniżenie plonowania jak i na obniżenie jakości otrzymanych owocników. Opracowany system oczyszczania skutecznie eliminował drobnoustroje. W etapie 2 realizacji operacji soplówka jeżowata owocowała w zoptymalizowanych warunkach dając plony owocników o wysokich parametrach użytkowych i funkcjonalnych.

Waga owocników zbieranych w pierwszym rzucie wynosiła średnio ok. 700 g, przy czym łączna waga zebrana z jednego substratu wynosiła średnio 1000 g.

W ramach realizacji prac badawczych etapu 2 skonstruowano prototypowe suszarnie do grzybów wyposażone w moduły zimnej plazmy przeznaczone do dezynfekcji komór suszarniczych (zdjęcie po prawej), w celu uzyskania suszu charakteryzującego się niskim stopniem zanieczyszczenia mikrobiologicznego.

W trakcie kolejno realizowanych badań ustalono, że dla zachowania wysokich parametrów funkcjonalnych owocników temperatura ich suszenia nie powinna przekraczać 40 stopni Celsjusza. Jednak suszenie w takich warunkach wiązało się ze wzrostem zanieczyszczenia mikrobiologicznego suszu, co zostało ograniczone dzięki zastosowaniu generatorów zimnej plazmy w prototypowych suszarniach.

wykorzystaniem suszarni przygotowywano próby suszu owocników, które przygotowywano w zmiennych warunkach temperatury i czasu suszenia, z wykorzystaniem prototypowych suszarni wyposażonych w 1, 2 i 3 generatory zimnej plazmy. Oznaczona liczba jonów w komorach wynosiła od 20 do 60 mln/cm3 powietrza. Oznaczona sucha masa owocników wynosiła średnio 15%. Otrzymane próby suszu mielono w młynku z wykorzystaniem sit 40-100 mesh, otrzymując proszek o różnej wielkości ziaren.

Próby suszu były badane bezpośrednio po ich wysuszeniu oraz po przechowywaniu przez różny okres w szczelnie zamkniętych pojemnikach lub po zapakowaniu w worki w pakowarce próżniowej w celu wyeliminowania wpływu tlenu i pary wodnej na parametry suszu.

Otrzymany w zmiennych warunkach susz charakteryzował się wizualną różnicą koloru, posiadał różny smak oraz zróżnicowane parametry takie jak: zawartość alfa- i beta glukanów, potencjał antyoksydacyjny i stopień zanieczyszczenia mikrobiologicznego.

Badania mikrobiologiczne wykonywano dla prób suszu w celu oznaczenia ogólnej liczby drobnoustrojów tlenowych, liczby drożdży i pleśni oraz obecności bakterii patogennych.

Zastosowanie generatorów zimnej plazmy miało decydujący wpływ na jakość mikrobiologiczną otrzymywanego suszu. Na poniższym zdjęciu od lewej widoczny jest rezultat posiewu suszu w kierunku oznaczenia liczby drożdży i pleśni, otrzymanego bez zastosowania oczyszczania komór suszarni oraz odpowiednio po zastosowaniu 1, 2 i 3 generatorów zimnej plazmy. Jak widać zastosowanie 1 generatora znacznie ogranicza stopień mikrobiologicznego zanieczyszczenia suszu, natomiast wykorzystanie 2 i 3, eliminuje drobnoustroje zupełnie.

Ważnym parametrem otrzymanego suszu jest zawartość alfa- i beta glukanów, gdyż parametr ten determinuje aktywność prozdrowotną preparatu przede wszystkim w zakresie wpływu na proces wspierania odporności. Stosując zmienne warunki przygotowywania, udało się uzyskać susz, który charakteryzował się zawartością beta glukanów wynoszącą powyżej 20%. Wartość taką uzyskuje się przeważnie dla preparatów poddanych ekstrakcji. Natomiast zawartość związków o potencjale antyoksydacyjnym w suszu sięgała powyżej 5 mM Tx/dm3 (test ABTS), powyżej 0,7 mM Tx/dm3 (test DPPH) przy indeksie elektrochemicznym wynoszącym powyżej 450 VxA/100g (CV i SWV). Dalsze prace badawcze będą obejmowały ocenę wpływu dodatkowej obróbki owocników z wykorzystaniem procesu liofilizacji i elektroporacji przed ich suszeniem. Pozwoli to na opracowanie optymalnego sposobu przygotowania suszu gwarantującego możliwie najwyższe parametry funkcjonalne przygotowanego preparatu.


Podsumowanie 1 etapu realizacji projektu.

30 grudnia 2023 r. odbyło się zebranie Rady Konsorcjum, w którym uczestniczyli Pani Ewa Myślińska – prezes spółki, Pani Marta Ligaj – kierownik projektu ze strony UEP oraz Pan Mariusz Mulka wraz z żoną Beatą. Na zebraniu podsumowano rezultaty badań Etapu 1.

Optymalizacja warunków uprawy soplówki wpłynęła na uzyskanie plonu owocników, których masa sięgała nawet 1000 g w obu rzutach. Ustalono optymalny skład podłoża uprawowego gwarantujący najwyższe plony, przy jednoczesnym uzyskaniu wysokich parametrów jakościowych owocników. Na plonowanie soplówki najbardziej korzystny wpływ miał dodatek łuski sojowej, natomiast na zawartość glukanów i aktywność antyoksydacyjną wpływał dodatek łuski z kawy oraz wytłoków z lnu, przy czym wyższy wpływ wykazano na wartość DPPH i indeksu elektrochemicznego, niż na wartość ABTS. Najbardziej niekorzystny wpływ na plonowanie i parametry jakościowe miał dodatek mielonej kukurydzy.

Ostatecznie opracowano skład podłoża na bazie trocin bukowych i dębowych oraz otrąb pszennych (z samopszy, orkiszu i płaskurki) z dodatkiem łuski sojowej i łusek z kawy. W zależności od odmiany soplówki ustalono optymalne parametry warunków wzrostu owocników. Odmiany oznaczone jako HE01 i HE13, dobrze owocowały w niższych temperaturach (16-20 stopni Celsjusza), natomiast w temperaturze 20 stopni najwyższy plon uzyskano dla odmiany HE14. Odmiana HE08 owocowała słabiej niezależnie od temperatury.

Można w związku z tym, w zależności od pory roku, prowadzić uprawę odmiany preferującej zróżnicowaną temperaturę, co ograniczy koszty zużycia energii elektrycznej związane z zapewnieniem odpowiedniej temperatury dla wegetacji grzyba. Ustalono również, że na wzrost soplówki nie miały zdecydowanego wpływu różnice wilgotności w zakresie 90-95%.

Poszczególne odmiany tworzyły owocniki o zróżnicowanym kształcie, co ilustrują poniższe zdjęcia kolejno owocników odmian HE01, HE08, HE13 i HE14. Zastosowanie niebieskiego oświetlenia, co jest widoczne na zdjęciach, korzystnie wpływało na wzrost owocników.

Instalacja pilotażowego systemu oczyszczania powietrza w hali uprawowej z wykorzystaniem oczyszczaczy fotokatalitycznych oraz generatorów zimnej plazmy zamontowanych w systemach nawiewowych miała zdecydowany wpływ na poprawę jakości mikrobiologicznej owocników.

Dzięki zastosowaniu tego systemu uzyskano redukcję zanieczyszczenia mikrobiologicznego powietrza na poziomie 70-80%, co przewyższyło planowane 50-60%. Miało to zdecydowany wpływ na jakość mikrobiologiczną owocników. W warunkach uprawy prowadzonych bez oczyszczania środowiska dochodziło czasem do pleśnienia i rozwoju bakterii na powierzchni substratu, zwłaszcza przy wilgotności 95%, i przenoszenia się zanieczyszczeń mikrobiologicznych na owocniki. Uprawa wymagała ścisłej kontroli i natychmiastowego usuwania zakażonych substratów.

Po zamontowaniu systemu oczyszczania środowiska uprawy rozwój drobnoustrojów na powierzchni substratu został zahamowany. Przyczyniło się to do uzyskania wysokiego stopnia czystości mikrobiologicznej owocników. Zamiast redukcji liczby zarodników pleśni w owocnikach planowanej na poziomie 30% osiągnięto rezultat wynoszący prawie 56%.

Ostatecznie dla owocników uprawianych w warunkach kontrolowanych uzyskano następujące parametry:

1) Plon owocników, zebrany w ustalonych jako optymalne warunkach kontrolowanych, czyli wilgotność na poziomie 90%, temperatura 20ºC i na zoptymalizowanych substratach uprawowych, był o co najmniej 30% wyższy dla wszystkich odmian. Najwyższy plon uzyskano dla odmian HE01 i HE14, gdzie jego przyrost wyniósł prawie 45%.

2) Zawartość suchej masy zawierająca się w zakresie od 11,35 (odmiana HE08, temperatura 16ºC, wilgotność 95%) do 22,65 (odmiana HE14, temperatura 20ºC, wilgotność 90%).

3) Zawartość β-glukanów wynosząca od 6,28 (odmiana HE08, podłoże z dodatkiem kukurydzy, temperatura 16ºC, wilgotność 90%) do 21,42 (odmiana HE14, podłoże z dodatkiem łuski kawy, temperatura 18ºC, wilgotność 95%) i α-glukanów od 0,69 (odmiana HE13, podłoże z dodatkiem kukurydzy, temperatura 16ºC, wilgotność 95%) do 2,39 (odmiana HE08, podłoże z dodatkiem łuski kawy i łuski soi, temperatura 16ºC, wilgotność 90%). Zauważono tendencję wskazującą na to, że zawartość β-glukanów jest negatywnie skorelowana z zawartością α-glukanów. Wyższa zawartość α-glukanów występowała w owocnikach uprawianych na podłożu z dodatkiem kukurydzy, jednocześnie dla owocników uprawianych na tym podłożu uzyskano najniższą zawartość β-glukanów, których najwięcej oznaczono w owocnikach pochodzących z upraw z dodatkiem łusek kawy i soi. Uzyskano zakładany stopień wzrostu zawartości β-glukanów w owocnikach soplówki jeżowatej wynoszący minimum 20% w stosunku do upraw prowadzonych w warunkach niekontrolowanych.

4) Aktywność antyoksydacyjna wyrażona w mM Tx/dm3 oznaczana zarówno testem ABTS jak i DPPH oraz na podstawie oznaczeń indeksu elektrochemicznego wykazała w przypadku owocników uprawianych na podłożach z dodatkiem łuski kawy ponad dwukrotny wzrost w stosunku do uprawy konwencjonalnej prowadzonej w warunkach niekontrolowanych. Zakładany w projekcie stopień wzrostu tej aktywności miał wynieść co najmniej 15%. Dodatek łuski kawy okazał się być najbardziej istotnym czynnikiem wpływającym na aktywność przeciwutleniającą. Dodatkowym czynnikiem była wysoka czystość mikrobiologiczna owocników uzyskana dzięki wprowadzeniu systemu oczyszczania powietrza. Owocniki wykazujące wysokie zanieczyszczenie mikrobiologiczne charakteryzowała znacznie niższa zawartość związków o działaniu przeciwutleniającym.

Celem etapu 1 było również wytypowanie odmiany grzyba, z której będzie produkowany susz w etapie 2. Analizując uzyskane wyniki badań zadecydowano, że będą to dwie odmiany: HE01 i HE14. Odmiany te charakteryzowały następujące parametry:

1) Najwyższa masa zebranych owocników, przy czym dla odmiany HE01 – wyższy plon w temperaturach niższych, a dla odmiany HE14 – wyższy plon w wyższych temperaturach, w niższych temperaturach plonowanie tej odmiany jest opóźnione. W związku z tym odmiana HE01 może być uprawiana z mniejszym nakładem energetycznym na ogrzewanie pomieszczenia uprawowego w warunkach zimowych, a odmiana HE14 w warunkach letnich, z mniejszym nakładem na chłodzenie.

2) Zbliżona zawartość glukanów w odmianach HE01 i HE14, w przypadku uprawy na zoptymalizowanym podłożu oraz w kontrolowanych warunkach (temperatura 20ºC, wilgotność 90%), zawartość ta została wystandaryzowana na poziomie minimum 20%, przy czym dla beta glukanów było to minimum 18%. Pozostałe dwie odmiany: HE08 i HE13 charakteryzowała zawartość glukanów na poziomie do 15%.

3) Najwyższa aktywność antyoksydacyjna, wynosząca minimum 4 mM Tx/dm3 (test ABTS), powyżej 0,65 mM Tx/dm3 (test DPPH) przy indeksie elektrochemicznym wynoszącym powyżej 400 VxA/100g (CV i SWV).

4) Wysoka odporność na zanieczyszczenia mikrobiologiczne – owocniki tych odmian wykazały najwyższą czystość mikrobiologiczną: poniżej 102 jtk/g owocnika. Najbardziej wrażliwą odmianą na zakażenia mikrobiologiczne była odmiana HE13, gdyż podczas jej uprawy sporadycznie dochodziło do rozwoju drobnoustrojów zarówno na powierzchni substratu jak i na powierzchni owocników.

Badania wykonane w etapie 1 obejmowały również ocenę parametrów jakościowych wytłoków z aronii, które miały stanowić dodatek do suplementów diety na bazie soplówki jeżowatej w celu podniesienia ich właściwości antyoksydacyjnych. W celu wytypowania wytłoków o najwyższych parametrach jakościowych, które zostały wykorzystane do wytworzenia mikrokapsułek, poddano ekstrakcji i wykonano badania potencjału antyoksydacyjnego wytłoków z aronii pochodzących z różnych źródeł.

Zarówno odmiana aronii, z której pochodziły wytłoki jak i sposób ekstrakcji wykazały istotny wpływ na uzyskane rezultaty badań. Ekstrakcję wykonywano przy użyciu alkoholu etylowego o stężeniu w zakresie 60–96% w łaźni ultradźwiękowej, gdzie stosowano czas sonikacji w zakresie od 10 do 30 minut. Przeprowadzona analiza statystyczna wykazała, że badane ekstrakty różniły się od siebie istotnie statystycznie aktywnością przeciwutleniającą. Spośród analizowanych ekstraktów najwyższą aktywność antyoksydacyjną, oznaczoną zarówno metodami chemicznymi jak i elektrochemicznymi, wykazano w próbkach ekstraktów uzyskanych przy użyciu 60% alkoholu etylowego podczas sonikacji trwającej 20 minut. Przykładowe wyniki zestawiono w poniższej tabeli.

Próbka

Wartość oznaczona testem DPPH

(mM Tx/dm3)

Wartość oznaczona testem ABTS

(mM Tx/dm3)

Indeks elektrochemiczny  VxmA/100g

Próbka WN1-nero

Próbka WG2

Próbka WN3-nero

Próbka WG4-galicjanka

4,99

7,98

5,35

5,70

     19,60

      17,59

       16,13

        19,45

2,12x103

1,84x103

1,68x103

1,99x103

Uzyskane wyniki wykazały wysoką aktywność antyoksydacyjną badanych ekstraktów w porównaniu do wyników uzyskanych dla owocników soplówki jeżowatej. Najwyższą aktywność wykazała odmiana oznaczona jako WG1. Dla porównania najwyższą aktywność antyoksydacyjną oznaczoną w owocnikach grzyba oznaczono na poziomie 4 mM Tx/dm3 (test ABTS), powyżej 0,65 mM Tx/dm3 (test DPPH) przy indeksie elektrochemicznym wynoszącym powyżej 4x102 VxA/100g (CV i SWV). Na podstawie uzyskanych wyników można stwierdzić, że dodatek wytłoków z aronii może znacznie podnieść funkcjonalność prozdrowotna suszu z owocników soplówki.

Dodatkowo, w celu podwyższenia zawartości związków o potencjale antyoksydacyjnym, wykonano proces fermentacji wytypowanej próby wytłoków z aronii odmiany WG1. Do badań wykorzystano bakterie fermentacji mlekowej oraz drożdże. Najwyższą zawartość związków przeciwutleniających wykazywały próby fermentowane z wykorzystaniem drożdży. W związku z tym do mikrokapsułek dodawano liofilizowane fermentowane wytłoki z aronii odmiany WG1.

Badania mikrobiologiczne wykonane z wykorzystaniem płytek Petrifilm w kierunku oznaczania zanieczyszczenia mikrobiologicznego mikrokapsułek w kierunku liczby bakterii saprofitycznych, drożdży i pleśni, liczby bakterii Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella sp. i Listeria sp. wykazały zróżnicowaną liczebność drobnoustrojów, w zależności od badanej próby. W 1 g próby oznaczono do 1,2x103 jtk bakterii, do 2,1x102 jtk drożdży, do 2,3x103 jtk pleśni. W przypadku oznaczania pozostałych grup drobnoustrojów, w kilku przypadkach wykryto pojedyncze kolonie gronkowców. Modyfikacja procesu wytwarzania poprzez wykorzystanie generatorów zimnej plazmy wpłynęła na znaczną poprawę jakości mikrobiologicznej, liczba drobnoustrojów obniżyła się o 2 log jtk, nie wykryto żadnych drobnoustrojów patogennych. Stanowi to o wysokim stopniu bezpieczeństwa mikrobiologicznego badanych prób.


W październiku odbyło się kolejne zebranie Rady Konsorcjum

W październiku odbyło się kolejne zebranie Rady Konsorcjum, na którym omówiono uzyskane wyniki badań i ustalono dalszy przebieg prac związanych z realizacją operacji. W zebraniu uczestniczyli członkowie Grupy Operacyjnej (Pani Ewa Myślińska – prezes spółki, Pani Marta Ligaj – kierownik projektu ze strony UEP oraz Pan Mariusz Mulka wraz z żoną Beatą).

Omówiono wyniki badań grzybów uprawianych w warunkach niekontrolowanych, które wykazały dużą zmienność, zwłaszcza w odniesieniu do wagi, suchej masy oraz właściwości antyoksydacyjnych zebranych owocników, co zestawiono w poniższej tabeli.

Pan Mariusz zebrał pierwsze plony z upraw soplówki jeżowatej prowadzonych w warunkach kontrolowanych.

Zebrane owocniki zostały przygotowane do badań, został również z nich przygotowany susz, co jest niezbędne do prowadzenia badań zawartości glukanów.

Dla zebranych owocników wykonano badania jakości mikrobiologicznej. Ustalono, że wprowadzenie systemu oczyszczania pomieszczenia uprawowego zredukowało zanieczyszczenie mikrobiologiczne owocników średnio o 1 rząd wielkości.

Na podstawie badań wykonanych u Rolnika ustalono, że do uzyskania 60% redukcji zanieczyszczenia mikrobiologicznego powietrza wystarczy wykorzystanie jednego oczyszczacza fotokatalitycznego w pomieszczeniu uprawowym oraz jednego generatora zimnej plazmy, który zamontowano w tunelu nawiewowym do namiotu uprawowego. Badania owocników pochodzących z upraw kontrolowanych są obecnie kontynuowane, zarówno na Uniwersytecie jak i w spółce Mykoherbals.

We wrześniu odbyło się kolejne zebranie Rady Nadzorczej.

We wrześniu odbyło się kolejne zebranie Rady Nadzorczej, na którym omówiono uzyskane wyniki badań i ustalono dalszy przebieg prac związanych z realizacją operacji. W zebraniu uczestniczyli członkowie Grupy Operacyjnej (Pani Ewa Myślińska - prezes spółki, Pani Marta Ligaj - kierownik projektu ze strony UEP oraz Pan Mariusz Mulka).

We wrześniu w spółce Mykoherbals wykonano badania drugiego rzutu owocników soplówki jeżowatej pochodzących z uprawy prowadzonej u Rolnika w warunkach niekontrolowanych. Uprawa była prowadzona w namiocie uprawowym (bez sterowania i kontroli takich parametrów jak: temperatura, wilgotność, stężenie CO2).

Okazało się, że soplówka jeżowata, w zależności od odmiany owocuje w różnym tempie, a jej owocniki osiągają zróżnicowaną masę w zależności od odmiany, składu podłoża uprawowego i warunków środowiskowych. Drugi rzut owocował wydajnie w przypadku wszystkich odmian, najwyższą masę miały owocniki odmian oznaczonych jako HE01, HE13 i HE14, na podłożu zawierającym łuskę sojową. Przykładowy zbiór owocników prezentuje zdjęcie poniżej.

Niektóre owocniki zebrane z pierwszego rzutu osiągnęły masę ponad 500 g (zwykle masa owocników zebranych z drugiego rzutu wynosi ok. 150-200 g). Poszczególne odmiany owocowały w różnym tempie – najszybciej zebrano plon z uprawy HE13, odmiana HE14 owocowała najpóźniej.

Dla zebranych owocników wykonano badania jakości mikrobiologicznej. Ustalono, że drugi rzut owocników charakteryzuje się nieco wyższym stopniem zanieczyszczenia mikrobiologicznego w porównaniu do rzutu drugiego, jednak rząd wielkości jest zbliżony. Wyniki wykonanych badań wykazały, że drugi rzut owocników uprawianych w warunkach niekontrolowanych oraz bez systemu oczyszczania pomieszczenia uprawowego charakteryzował się stopniem zanieczyszczenia mikrobiologicznego wynoszącym w przypadku ogólnej liczby bakterii od 102 do 105 jtk/g owocnika, a przypadku drożdży i pleśni od 101 do 103 jtk/g owocnika.

W homogenizatach przygotowanych z zebranych owocników oznaczono zawartość suchej masy i związków o potencjale antyoksydacyjnym.

Sucha masa, w zależności od odmiany i czasu zbioru zawierała się w granicach 13,88-20,62%. Można wywnioskować, że była wyższa w porównaniu do pierwszego zbioru owocników. Aktywność antyoksydacyjna oznaczona testem DPPH wynosiła od 0,33 do nawet 0,64, a testem ABTS 1,82 do 4,19 mM Tx/dm3. Dla badanych ekstraktów z owocników, przy wykorzystaniu techniki woltamperometrii cyklicznej (CV) i woltamperometrii fali prostokątnej (SWV), wyznaczono indeks elektrochemiczny wyrażający powierzchnię uzyskanych sygnałów na 100 g masy surowych owocników. Wynosił on od 101 do 448 VxA/100g (CV) i od 98 do 387 VxA/100g (SWV). Uzyskane wyniki wykazały, że drugi zbiór owocników ma zbliżone, a nawet nieco wyższe parametry pod względem jakościowym (sucha masa miała wyższą wartość) i funkcjonalnym (nieco wyższa aktywność antyoksydacyjna). Badania wykonywano dla owocników świeżych, przechowywanych przez 5 dni w warunkach chłodniczych oraz mrożonych. Dla wszystkich prób uzyskano zbliżone wyniki oznaczeń aktywności antyoksydacyjnej. Dla zhomogenizowanych owocników wykonano również pomiary pH, które mieściły się w zakresie od 4,7 do 6, proces przechowywania nie wpływał na zmiany pH. Owocniki, lekko podsmażone na oleju rzepakowym, zostały poddane ocenie sensorycznej, w trakcie której oceniano smak, zapach, barwę, konsystencję oraz pożądalność ogólną. Testowano owocniki świeże, przechowywane 5 dni w warunkach chłodniczych oraz mrożone. Najniższe parametry jakości sensorycznej wykazały owocniki mrożone. Poszczególne odmiany uprawiane na zróżnicowanych podłożach znacznie różniły się jakością sensoryczną, zwłaszcza pod względem smaku i zapachu. Najwyższą pożądalność sensoryczną wykazano dla odmian uprawianych na podłożach zawierających dodatek łusek z kawy. W niektórych przypadkach dominował smak słodki, w innych ostry albo kwaśny (dominujący w przypadku owocników mrożonych), pojawiało się też czasem odczucie goryczki. Zapach od typowo grzybowego po słabo wyczuwalny (zwłaszcza dla owocników mrożonych). Owocniki mrożone miały również gumowatą konsystencję. Na podstawie wyników badań przeprowadzonych na Uniwersytecie można stwierdzić, że proces mrożenia owocników znacznie obniża walory sensoryczne owocników, ale co istotne ich funkcjonalność antyoksydacyjna zostaje zachowana.

We wrześniu, u Rolnika przeprowadzono proces inkubacji zaszczepionych w sierpniu 4 wytypowanych odmian soplówki jeżowatej na 3 zróżnicowanych podłożach uprawowych celem przeprowadzenia uprawy w przygotowanych pomieszczeniach uprawowych w warunkach kontrolowanych. Ze względu na konieczność jednoczesnego prowadzenia upraw w dwóch zróżnicowanych warunkach środowiskowych przygotowano dwa namioty uprawowe.

Na Uniwersytecie prowadzono również oznaczanie aktywności antyoksydacyjnej wytłoków z aronii pochodzących z różnych odmian, celem wytypowania odmiany charakteryzującej się najwyższym potencjałem antyoksydacyjnym, która będzie wykorzystana do wytworzenia mikrokapsułek stanowiących dodatek do suszu z soplówki, celem podniesienia parametrów funkcjonalnych uzyskanych preparatów.

Opracowana metodyka ekstrakcji (ekstrakcja 60% alkoholem etylowym podczas sonikacji trwającej 20 minut) umożliwiła uzyskanie ekstraktów charakteryzujących się najwyższym potencjałem antyoksydacyjnym, wynoszącym średnio: DPPH – 0,82, ABTS - 7,14 mM Tx/dm3, indeks elektrochemiczny - 626 VxA/100g (CV) i 639 VxA/100g (SWV). Oznaczona zawartość związków o potencjale antyoksydacyjnym wykazała, że dodatek ekstraktu z wytłoków z aronii może w znacznym stopniu podnieść aktywność przeciwrodnikową suszu z soplówki jeżowatej.


W spółce Mykoherbals w miesiącach lipiec-sierpień wykonano badania

W spółce Mykoherbals w miesiącach lipiec-sierpień wykonano badania zanieczyszczenia mikrobiologicznego owocników soplówki jeżowatej pochodzących z uprawy prowadzonej u Rolnika w warunkach niekontrolowanych. Ze względu na wysokie temperatury panujące w pomieszczeniach uprawowych, co hamowało wzrost owocników, uprawa była prowadzona na regałach ustawionych na zewnątrz pomieszczeń, w zacienionym miejscu.

Poszczególne odmiany owocowały w zróżnicowanym tempie, co jest widoczne na zamieszczonym zdjęciu. Najbardziej wydajnie owocowała odmiana oznaczona jako HE13, na podłożu zawierającym trociny bukowe i łuskę sojową. Niektóre owocniki zebrane z pierwszego rzutu osiągnęły masę ponad 800 g (zwykle łączna masa zebranych owocników wynosi 300-500 g).

Dla zebranych owocników regularnie wykonywano badania jakości mikrobiologicznej. Uzyskane wyniki pozwoliły na ustalenie optymalnego czasu zbioru owocników, tak aby nie dochodziło do ich znacznego zanieczyszczenia mikrobiologicznego. Wyniki wykonanych badań wykazały, że owocniki uprawiane w warunkach niekontrolowanych oraz bez systemu oczyszczania pomieszczenia uprawowego charakteryzowały się znacznym stopniem zanieczyszczenia mikrobiologicznego wynoszącym w przypadku ogólnej liczby bakterii od 102 do 104 jtk/g owocnika, a przypadku drożdży i pleśni od 101 do 103 jtk/g owocnika. Problemem w uprawie prowadzonej poza pomieszczeniami były też uszkodzenia owocników wywoływane przez owady.

W zebranych owocnikach oznaczano również suchą masę i zawartość związków o potencjale antyoksydacyjnym. Sucha masa, w zależności od odmiany i czasu zbioru zawierała się w granicach 11-21%. Aktywność antyoksydacyjna oznaczona testem DPPH wynosiła od 0,13 do nawet 0,60, a testem ABTS 1,97 do 4,28 mM Tx/dm3. Dla badanych ekstraktów z owocników, przy wykorzystaniu techniki woltamperometrii cyklicznej (CV) i woltamperometrii fali prostokątnej (SWV), wyznaczono indeks elektrochemiczny wyrażający powierzchnię uzyskanych sygnałów na 100 g masy surowych owocników. Wynosił on od 87 do 426 VxA/100g (CV) i od 85 do 353 VxA/100g (SWV). Dla zhomogenizowanych owocników wykonano również pomiary pH, które mieściły się w zakresie od 4,5 do 6. Owocniki, lekko podsmażone na oleju rzepakowym, zostały poddane ocenie sensorycznej, w trakcie której oceniano smak, zapach, wygląd (kolor), konsystencję i chrupkość. Poszczególne odmiany uprawiane na zróżnicowanych podłożach znacznie różniły się jakością sensoryczną, zwłaszcza pod względem smaku i zapachu. W niektórych przypadkach dominował smak słodki, w innych ostry albo kwaśny, pojawiało się też czasem odczucie goryczki. Zapach od typowo grzybowego po słabo wyczuwalny.

W sierpniu przygotowano kolejne zaszczepki 4 wytypowanych odmian soplówki jeżowatej celem przeprowadzenia uprawy u Rolnika w przygotowanych pomieszczeniach uprawowych.

Wykonano również badania optymalizacji procesu emisji jonów ujemnych przez generatory zimnej plazmy. Badania miały na celu ustalenie zależności pomiędzy odległością szczotek generatora i intensywnością nawiewu wentylatora a liczbą jonów zmierzoną przez miernik jonów. W celu wykonania badań skonstruowano stanowisko robocze, widoczne na zdjęciu, zawierające układ pomiarowy składający się z generatora zimnej plazmy, wentylatora, miernika jonów oraz zasilacza z regulacją napięcia zasilania wentylatora.

Celem badań było ustalenie maksymalnej odległości oraz intensywności nawiewu, przy którym będzie możliwe uzyskanie liczby jonów powyżej 100 mln/cm3 powietrza. Badania te są niezbędne do ustalenia parametrów konstrukcji prototypowych suszarek przeznaczonych do suszenia owocników soplówki jeżowatej w warunkach zapewniających redukcję liczby drobnoustrojów w suszu. Optymalizując nawiew obniżano wentylator (zbyt szeroki strumień powietrza powodował drastyczny spadek liczby jonów) i następnie regulowano intensywność strumienia nawiewanego powietrza poprzez zmianę napięcia na zasilaczu. Ustalone optymalne parametry: odległość nawiewu wentylatora od szczotek elektrod - 8 cm, napięcie ustawione na zasilaczu - 11 V, zapewniające stężenie jonów ujemnych niezbędne do konstrukcji prototypów suszarek. Dalsze zwiększanie napięcia nie ma już istotnego wpływu na wydajność emisji jonów.

Ustalono również wpływ czynników środowiskowych takich jak temperatura i wilgotność powietrza na wydajność pracy generatorów zimnej plazmy. Badania liczby jonów wykonano w zakresie temperatur od 34 do 50℃ i wilgotności od 50 do 90%, czyli w warunkach zbliżonych do tych, które będą panowały w komorach suszarek w trakcie procesu suszenia owocników soplówki. W badaniach wykonanych na Uniwersytecie Ekonomicznym w Poznaniu wykazano, że temperatura suszenia owocników przekraczająca 50℃ powoduje spadek zawartości związków o potencjale antyoksydacyjnym w otrzymanym suszu, dlatego nie wykonywano badań w wyższej temperaturze. Nie zaobserwowano znaczących różnic w liczbie jonów generowanych przez łuk elektryczny zimnej plazmy.

W kolejno wykonanych badaniach zaprojektowano system dezynfekcji pomieszczeń uprawowych u Rolnika z wykorzystaniem oczyszczaczy fotokatalitycznych i generatorów zimnej plazmy. Przed zainstalowaniem systemu wykonano pomiary zanieczyszczenia mikrobiologicznego pomieszczeń uprawowych metodą zderzeniową. Dominującą grupę drobnoustrojów zanieczyszczających powietrze stanowiły pleśnie (zdjęcie poniżej), które są największym zagrożeniem w trakcie owocowania soplówki jeżowatej.

Opracowano również metodykę ekstrakcji i wykonano badania potencjału antyoksydacyjnego wytłoków z aronii pochodzących z różnych źródeł, celem wytypowania tych które charakteryzuje najwyższa zawartość związków redoks i które będą wykorzystane do wytworzenia mikrokapsułek. Zarówno odmiana aronii, z której pochodziły wytłoki jak i sposób ekstrakcji wykazały istotny wpływ na uzyskane rezultaty badań. Ekstrakcję wykonywano przy użyciu alkoholu etylowego o stężeniu w zakresie 60–96% w łaźni ultradźwiękowej, gdzie stosowano czas sonikacji w zakresie od 10 do 30 minut. Przeprowadzona analiza statystyczna wykazała, że badane ekstrakty różniły się od siebie istotnie statystycznie aktywnością przeciwutleniającą. Spośród analizowanych ekstraktów najwyższą aktywność antyoksydacyjną, oznaczoną zarówno metodami chemicznymi jak i elektrochemicznymi, wykazano w próbkach ekstraktów uzyskanych przy użyciu 60% alkoholu etylowego podczas sonikacji trwającej 20 minut.


Przygotowano pomieszczenia pod namioty uprawowe

Przygotowano pomieszczenia pod namioty uprawowe, w których będzie prowadzona uprawa przez Rolnika 4 wytypowanych odmian soplówki jeżowatej na 3 opracowanych podłożach uprawowych, w warunkach niekontrolowanych jako próba odniesienia oraz w warunkach kontrolowanych (kontrola temperatury, wilgotności oraz CO2).


W spółce Mykoherbals rozpoczęto prace

W spółce Mykoherbals rozpoczęto prace nad modyfikacją składu podłoży uprawowych celem ustalenia ich wpływu na zawartość związków o potencjale antyoksydacyjnym w owocnikach soplówki jeżowatej oraz pozyskanym z nich suszu. Zaprojektowano 3 podłoża uprawowe o zróżnicowanym składzie na bazie trocin bukowych, otrębów pszennych i łusek sojowych z dodatkiem łusek z kawy, wytłoków z roślin oleistych, mielonej kukurydzy.

Na Uniwersytecie Ekonomicznym kontynuowano badania dotyczące oceny parametrów funkcjonalnych: zawartość związków o potencjale antyoksydacyjnym oraz jakościowych owocników soplówki jeżowatej i suszu z nich otrzymanego. Badania prowadzono dla owocników przechowywanych w warunkach chłodniczych w celu ustalenia okresu ich przydatności do spożycia oraz do prztwórstwa.


Rozpoczęto realizację prac badawczych

Rozpoczęto realizację prac badawczych na Uniwersytecie Ekonomicznym w Poznaniu. Owocniki do badań wstępnych oraz susz z nich pozyskany pochodziły z uprawy prowadzonej przez prof. Marka Siwulskiego oraz z uprawy komercyjnej. Badane owocniki zostały oznaczone jako kolejne numery HE.

We wstępnych pracach zoptymalizowano procedury badania właściwości antyoksydacyjnych z wykorzystaniem metod chemicznych: DPPH i ABTS oraz elektrochemicznych: woltamperometria cykliczna (CV) i woltamperometria fali prostokątnej (SWV).


Zwołano pierwszą Radę Konsorcjum

W dniu 9 czerwca 2023 r. zwołano pierwszą Radę Konsorcjum po otrzymaniu dofinansowania. W Plewiskach, o godzinie 11:00 w siedzibie spółki Mykoherbals sp. z o.o., która pełni funkcję Lidera Konsorcjum przeprowadzono dwugodzinne obrady. Przeanalizowano obecny postęp prac i ustalono plany na najbliższe tygodnie.