Dla uprawy prowadzonej w warunkach niekontrolowanych (NK) uzyskano następujące wyniki badań:
Dla uprawy prowadzonej warunkach kontrolowanych 1K: 16°C, wilgotność 90%, system
dezynfekcji pomieszczeń uprawowych uzyskano następujące wyniki badań:
Dla uprawy prowadzonej warunkach kontrolowanych 2K: 16°C, wilgotność 95%, system
dezynfekcji pomieszczeń uprawowych uzyskano następujące wyniki badań:
Dla uprawy prowadzonej warunkach kontrolowanych 3K: 18°C, wilgotność 90%, system
dezynfekcji pomieszczeń uprawowych uzyskano następujące wyniki badań:
Dla uprawy prowadzonej warunkach kontrolowanych 4K: 18°C, wilgotność 95%, system
dezynfekcji pomieszczeń uprawowych uzyskano następujące wyniki badań:
Dla uprawy prowadzonej warunkach kontrolowanych 5K: 20°C, wilgotność 90%, system
dezynfekcji pomieszczeń uprawowych uzyskano następujące wyniki badań:
Dla uprawy prowadzonej warunkach kontrolowanych 6K: 20°C, wilgotność 95%, system
dezynfekcji pomieszczeń uprawowych uzyskano następujące wyniki badań:
Optymalizacja warunków uprawy soplówki wpłynęła na uzyskanie plonu owocników, których masa sięgała nawet 1000 g w obu rzutach. Dla uprawy prowadzonej warunkach kontrolowanych 5K: 20°C, wilgotność 90%, system dezynfekcji pomieszczeń uprawowych uzyskano najwyższy łączny plon wynoszący ponad 96 kg.
Ustalono optymalny skład podłoża uprawowego gwarantujący najwyższe plony, przy jednoczesnym uzyskaniu wysokich parametrów jakościowych owocników. Na plonowanie soplówki najbardziej korzystny wpływ miał dodatek łuski sojowej, natomiast na zawartość glukanów i aktywność antyoksydacyjną wpływał dodatek łuski z kawy oraz wytłoków z lnu, przy czym wyższy wpływ wykazano na wartość DPPH i indeksu elektrochemicznego, niż na wartość ABTS. Najbardziej niekorzystny wpływ na plonowanie i parametry jakościowe miał dodatek mielonej kukurydzy i mielonych ziaren soi.
Ostatecznie opracowano skład podłoża na bazie trocin bukowych i dębowych oraz otrąb pszennych (z samopszy, orkiszu i płaskurki) z dodatkiem łuski sojowej, łusek z kawy i wytłoków z lnu. W zależności od odmiany soplówki ustalono optymalne parametry warunków wzrostu owocników. Odmiany oznaczone jako HE01 i HE13, dobrze owocowały w niższych temperaturach, natomiast w temperaturze 20 stopni najwyższy plon uzyskano dla odmiany HE14. Odmiana HE08 owocowała słabiej niezależnie od temperatury.
Można w związku z tym, w zależności od pory roku, prowadzić uprawę odmiany preferującej zróżnicowaną temperaturę, co ograniczy koszty zużycia energii elektrycznej związanej z zapewnieniem odpowiedniej temperatury dla wegetacji grzyba. Ustalono również, że na wzrost soplówki nie miały zdecydowanego wpływu różnice wilgotności w zakresie 90-95%, natomiast w niższej wilgotności obserwowano niższe zanieczyszczenie mikrobiologiczne owocników.
Instalacja pilotażowego systemu oczyszczania powietrza w hali uprawowej z wykorzystaniem oczyszczaczy fotokatalitycznych oraz generatorów zimnej plazmy zamontowanych w systemach nawiewowych miała zdecydowany wpływ na poprawę jakości mikrobiologicznej owocników. W warunkach uprawy prowadzonych bez oczyszczania środowiska dochodziło czasem do pleśnienia i rozwoju bakterii na powierzchni substratu, zwłaszcza przy wilgotności 95%, i przenoszenia się zanieczyszczeń mikrobiologicznych na owocniki. Uprawa wymagała ścisłej kontroli i natychmiastowego usuwania zakażonych substratów. Po wprowadzeniu systemu oczyszczania pomieszczeń uprawowych stopień zanieczyszczenia mikrobiologicznego owocników został obniżony o 2 rzędy wielkości. Po zamontowaniu systemu oczyszczania środowiska uprawy rozwój drobnoustrojów na powierzchni substratu został zahamowany. Przyczyniło się to do uzyskania wysokiego stopnia czystości mikrobiologicznej owocników. Zamiast redukcji liczby zarodników pleśni w owocnikach planowanej na poziomie 30% osiągnięto rezultat wynoszący co najmniej 56%.
Ostatecznie dla owocników uprawianych w warunkach kontrolowanych uzyskano następujące parametry:
1) Plon owocników, zebrany w ustalonych jako optymalne warunkach kontrolowanych, czyli wilgotność na poziomie 90%, temperatura 20°C i na zoptymalizowanych substratach uprawowych, był o co najmniej 30% wyższy dla wszystkich odmian łącznie. Najwyższy wzrost plonowania uzyskano dla odmian HE01 i HE14.
2) Zawartość suchej masy zawierająca się w zakresie od 11,35 (odmiana HE08, temperatura 16°C, wilgotność 95%) do 22,65 (odmiana HE14, temperatura 20°C, wilgotność 90%).
3) Zawartość β-glukanów wynosząca od 6,28 (odmiana HE08, podłoże z dodatkiem kukurydzy, temperatura 16°C, wilgotność 90%) do 21,42 (odmiana HE14, podłoże z dodatkiem łuski kawy, temperatura 18°C, wilgotność 95%) i α-glukanów od 0,69 (odmiana HE13, podłoże z dodatkiem kukurydzy, temperatura 16°C, wilgotność 95%) do 2,39 (odmiana HE08, podłoże z dodatkiem łuski kawy i łuski soi, temperatura 16°C, wilgotność 90%).
Zauważono tendencję wskazującą na to, że zawartość β-glukanów jest negatywnie skorelowana z zawartością α-glukanów. Wyższa zawartość α-glukanów występowała w owocnikach uprawianych na podłożu z dodatkiem kukurydzy, jednocześnie dla owocników uprawianych na tym podłożu uzyskano najniższą zawartość β-glukanów, których najwięcej oznaczono w owocnikach pochodzących z upraw z dodatkiem łusek kawy i soi. Uzyskano zakładany stopień wzrostu zawartości β-glukanów w owocnikach soplówki jeżowatej wynoszący minimum 20% w stosunku do upraw prowadzonych w warunkach niekontrolowanych.
4) Aktywność antyoksydacyjna wyrażona w mM Tx/dm3 oznaczana zarówno testem ABTS, jak i DPPH oraz na podstawie oznaczeń indeksu elektrochemicznego wykazała zakładany w projekcie stopień wzrostu wynoszący co najmniej 15% w stosunku do uprawy konwencjonalnej prowadzonej w warunkach niekontrolowanych. Dodatek łuski kawy oraz łuski sojowej okazał się być najbardziej istotnym czynnikiem wpływającym na aktywność przeciwutleniającą.
Celem etapu 1 było również wytypowanie odmiany grzyba, z której będzie produkowany susz w etapie 2. Analizując uzyskane wyniki badań, zadecydowano, że będą to dwie odmiany: HE01 i HE14. Odmiany te charakteryzowały następujące parametry:
1) Najwyższa masa zebranych owocników, przy czym dla odmiany HE01 – wyższy plon w temperaturach niższych (18°C), a dla odmiany HE14 – wyższy plon w wyższych temperaturach (20°C), w niższych temperaturach plonowanie tej odmiany jest opóźnione. W związku z tym odmiana HE01 może być uprawiana z mniejszym nakładem energetycznym na ogrzewanie pomieszczenia uprawowego w warunkach zimowych, a odmiana HE14 w warunkach letnich, z mniejszym nakładem na chłodzenie.
2) Zbliżona zawartość glukanów w odmianach HE01 i HE14, w przypadku uprawy na zoptymalizowanym podłożu oraz w kontrolowanych warunkach (temperatura 20°C, wilgotność 90%), zawartość ta została wystandaryzowana na poziomie minimum 20%, przy czym dla beta-glukanów było to minimum 19%. Pozostałe dwie odmiany: HE08 i HE13, charakteryzowała zawartość glukanów na poziomie poniżej 20%.
3) Najwyższa aktywność antyoksydacyjna, wynosząca minimum 4 mM Tx/dm3 (test ABTS), powyżej 0,65 mM Tx/dm3 (test DPPH) przy indeksie elektrochemicznym wynoszącym powyżej 400 VxμA/100g (CV i SWV).
4) Wysoka odporność na zanieczyszczenia mikrobiologiczne – owocniki tych odmian wykazały najwyższą czystość mikrobiologiczną: rzędu 102 jtk/g owocnika. Najbardziej wrażliwą odmianą na zakażenia mikrobiologiczne była odmiana HE13, gdyż podczas jej uprawy sporadycznie dochodziło do rozwoju drobnoustrojów zarówno na powierzchni substratu, jak i na powierzchni owocników.
2. Instalacja i monitorowanie działania pilotażowego systemu oczyszczania powietrza oraz kontroli wilgotności i temperatury w hali uprawowej.
W powietrzu pomieszczeń uprawowych oraz w kanałach wentylacyjnych montowano zmienną liczbę generatorów zimnej plazmy oraz oczyszczaczy fotokatalitycznych i dokonywano pomiarów liczby jonów ujemnych (miernik AIR ION COUNTER, Alpha Lab Inc). Układ oczyszczaczy był modyfikowany tak, aby utrzymać liczbę jonów wynoszącą co najmniej 100 mln/cm3 powietrza (metodą posiewów płytkowych ustalono, że taki poziom jonów zapewnia inaktywację drobnoustrojów).
Pomiary zanieczyszczenia mikrobiologicznego powietrza wykonywano metodą zderzeniową z wykorzystaniem próbnika TRIO.BA STM Mini. Posiewano 100, 250 i 500 l powietrza z szybkością 100 l na minutę. Łącznie pobrano powietrze w 6 punktach pomiarowych. Oznaczanie ogólnej liczby bakterii wykonano na podłożu PCA (Plate Count Agar, Argenta, Poznań), ogólnej liczby drożdży i pleśni na podłożu Sabouraud’a (Argenta, Poznań).
Wykonano również badania optymalizacji procesu emisji jonów ujemnych przez generatory zimnej plazmy. Badania miały na celu ustalenie zależności pomiędzy odległością szczotek generatora i intensywnością nawiewu wentylatora, a liczbą jonów zmierzoną przez miernik jonów. W celu wykonania badań skonstruowano stanowisko robocze, zawierające układ pomiarowy składający się z generatora zimnej plazmy, wentylatora, miernika jonów oraz zasilacza z regulacją napięcia zasilania wentylatora.
Celem badań było ustalenie maksymalnej odległości oraz intensywności nawiewu, przy którym będzie możliwe uzyskanie liczby jonów powyżej 100 mln/cm3 powietrza.
W kolejno wykonanych badaniach zaprojektowano system dezynfekcji pomieszczeń uprawowych u Rolnika z wykorzystaniem oczyszczaczy fotokatalitycznych i generatorów zimnej plazmy. Przed zainstalowaniem systemu wykonano pomiary zanieczyszczenia mikrobiologicznego pomieszczeń uprawowych metodą zderzeniową. Dominującą grupę drobnoustrojów zanieczyszczających powietrze stanowiły pleśnie, które są największym zagrożeniem w trakcie owocowania soplówki jeżowatej.
W trakcie uprawy w pomieszczeniach uprawowych Rolnika regularnie wykonywane były badania zanieczyszczenia mikrobiologicznego powietrza metodą zderzeniową. Pomiarów dokonywano w trzech punktach pomiarowych w kierunku badania liczby bakterii oraz liczby drożdży i pleśni w 1 m3 powietrza. W poniższych tabelach zestawiono uzyskane wyniki oznaczeń wykonanych przez pracownika zatrudnionego u Rolnika.
W trakcie całego cyklu uprawy modyfikowano, w zależności od zastosowanych warunków i wyników badań mikrobiologicznych, liczbę i rozmieszczenie generatorów zimnej plazmy i oczyszczaczy fotokatalitycznych. Dzięki zastosowaniu tego systemu uzyskano redukcję zanieczyszczenia mikrobiologicznego powietrza na poziomie 70-80% w przypadku pleśni i do 90% w przypadku bakterii, co znacznie przewyższyło planowane 50-60%. Wysoka czystość pomieszczeń uprawowych miała zdecydowany wpływ na znaczną redukcję zanieczyszczenia owocników zarówno bakteriami jak i pleśniami i uzyskaną wysoką jakość mikrobiologiczną owocników.